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小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格

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小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格 詳細(xì)資料

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產(chǎn)品名稱:小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格
英文名稱: Hsp-20 ELISA Kit
規(guī)格:96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床 。

小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格類型和操作步驟
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有3種必要的試劑:
①固相的抗原或抗體,
②酶標(biāo)記的抗原或抗體,
③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來源和標(biāo)本的性狀以及檢測的具備條件,可設(shè)計出各種不同類型的檢測方法。
(一)雙抗體夾心法、
(二)一步法、
(三)間接法測抗體、
(四)競爭法。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格標(biāo)本要求
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可向客服索取說明書》》 在線索取
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測樣品孔中 先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘。
0. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后5分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格技術(shù)流程:
一、雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
、用緩沖液將抗體稀釋至-0ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。
二、間接法(檢測未知抗體)
、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至-0ug/ml, 每孔加0.ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標(biāo)抗體:于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.ml,37℃ 0~30分鐘。
5、終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則40nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.倍,即為陽性。

STK0    重組人 STK0 / LOK 蛋白 (His 標(biāo)簽)    STK0
ALDHA    重組人 ALDH / ALDHA / ALDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ALDHA
CD68    重組人 CD68 / Macrosialin / Gp0 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)    CD68
GBA3    重組人 GBA3 / CBGL 蛋白 (His 標(biāo)簽)    GBA3
CSNKG    重組人 CSNKG / CKI-gamma 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)    CSNKG
ALCAM    重組人 ALCAM / CD66 蛋白 (His 標(biāo)簽)    ALCAM
HYOU    重組人 ORP50 / HYOU / HSP2A 蛋白 (His 標(biāo)簽)    HYOU
SIRPA    重組人 SIRP alpha / CD72a 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SIRPA
PVRL    重組人 CD / Nectin- / PVRL 蛋白 (His 標(biāo)簽)    PVRL
PVRL    重組人 CD / Nectin- / PVRL 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)    PVRL
SEMA5A    重組人 Semaphorin 5A / SEMA5A 蛋白 (His 標(biāo)簽)    SEMA5A
CD5L    重組人 CD5L / API6 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CD5L
CD244    重組人 2B4 / SLAMF / CD244 蛋白 (His 標(biāo)簽)    CD24422-0420-5    JC-0    5mg
70302-00    一步離心式石蠟清除劑    00 次
前列上皮細(xì)胞生長因子    5mL    
丙烯葡聚糖凝膠 S-200 HR    50mL    
動物 RNAout(TRIzol)     250mL    
T4 聚核苷酸激酶    200U    
20902-200    人 NK 細(xì)胞分離液 .062    200mL
8092-    96 孔板病毒 DNAout( 離心法 )    次
ROX 參考染料 II    00μL    
赤蘚紅 B 二鹽    5g    
RNase-free Tris HCl,M,pH 6.5    00mL    
人白細(xì)胞分離液 .078    200mL    
8-0340-00    過氧化氫酶測試盒 ( 可見光比色法 )    00 T
002-2500    TAE 電泳液 ,50×    2500mL
小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)酶聯(lián)免疫elisa試劑盒規(guī)格山羊抗大鼠 IgG(H+L),堿性磷酸酶標(biāo)記    00μL    
DNA  CTAB( 十六烷基*基 )    00g    
RNA  Tris Base( 三羥甲基氨基甲烷 )    00g    
AG 菌種    mL    
00209-800    Bst DNA 聚合酶,大片段    800U
00873-00    電泳尿素    00g
T3 體外轉(zhuǎn)錄試劑盒    50 次    
蛋白胨    250g    

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