C666-1人鼻咽癌細(xì)胞

商品屬性

商品介紹

細(xì)胞別稱(chēng)：C666-1；人鼻咽癌細(xì)胞株

種屬來(lái)源：人

年齡性別：

組織來(lái)源：鼻

生長(zhǎng)特性：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

重要提醒C666-1細(xì)胞對(duì)血清要求高，培養(yǎng)血清濃度不得低于15%的，細(xì)胞密度80%時(shí)傳代建議按1：2傳代（一個(gè)T25傳2個(gè)6cm），細(xì)胞培養(yǎng)不要太稀，1比2傳代，傳代后24h不要移動(dòng)細(xì)胞，經(jīng)常看細(xì)胞，移動(dòng)培養(yǎng)皿是非常影響細(xì)胞貼壁的、不然會(huì)長(zhǎng)的非常慢，該細(xì)胞對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求高，請(qǐng)務(wù)必保持營(yíng)養(yǎng)充足；

生物安全等級(jí)：1

細(xì)胞規(guī)格：1×106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)：

細(xì)胞處理：

1） 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇：

將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶（或皿）中37℃培養(yǎng)過(guò)夜。第二天顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)情況和細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。

3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：

（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。

（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀(guān)察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。

（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。

（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。

（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。

（9）細(xì)胞凍存

公司正在出售的產(chǎn)品：

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白 Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CNDP2 Protein Human 重組人 CNDP2 / CPGL / PEPA 蛋白

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CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

TNFRSF1B重組人 TNFR2 / CD120b / TNFRSF1B 蛋白 (aa 1-268, 196 Met/Arg, His 標(biāo)簽) Protein

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小鼠生長(zhǎng)因子(GH)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human immunoglobulin E, Fc segme receptor (Fc epsilon R I) ELISA Kit E Fc段受體Ⅰ(FcεRⅠ)檢測(cè)試劑盒

HumanAquaporin0,AQP-0ELISAKit 人水通道蛋白0(AQP-0)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Elisa藍(lán)耳病檢測(cè)試劑盒5*96孔5*96孔

真菌/酵母a-(a-AMYLASE)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Mousecross-linkedC-telopeptidesofTypeⅠcollagen,CⅠCPELISAKit小鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

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小鼠白三烯C4   英文名稱(chēng)：   Mouse Leukoiene C4   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   LTC4

小鼠脂蛋白酯酶   英文名稱(chēng)：   Mouse Lipopeinlipase   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   LPL

小鼠白三烯   英文名稱(chēng)：   Mouse leukoiene   規(guī)格：      英文縮寫(xiě)：   LT3

大鼠6(KLK6)檢測(cè)試劑盒 ，英文名： KLK6 ELISA Kit

Mouse tumor necrosis factor related apoptosis inducing ligand 4 (AIL-R4) ELISA Kit 小鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體4(AIL-R4)檢測(cè)試劑盒

RatCXC-chemokinereceptor3,CXCR3ELISAKit 大鼠CXC趨化因子受體3(CXCR3)檢測(cè)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforFcGammaRIII/CD16(HumaeceptorIIIfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcGammaRIII)ELISAKitGFc段受體Ⅲ

細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

Ratnicotinicacetylcholinereceptor,N-AChRELISAKit大鼠型乙酰受體(N-AChR)檢測(cè)試劑盒規(guī)格：96T/48T

細(xì)胞接收后的處理：

1）收到細(xì)胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。

2）請(qǐng)?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀(guān)照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。

3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過(guò)程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀(guān)察細(xì)胞的生長(zhǎng)密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長(zhǎng)密度達(dá)70%-80%以上，可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過(guò)程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。