細胞處理：

1） 凍存細胞的復蘇：

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法：

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25％（w / v）-0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3.輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

hacat人永生化表皮細胞

商品屬性

商品介紹

細胞別稱：hacat；人永生化角質形成細胞

種屬來源：人

年齡性別：62歲，男

組織來源：皮膚

生長特性：貼壁生長

細胞形態：成纖維細胞樣

參考資料(來源文獻)

生物安全等級：

細胞規格：1×106cells/T25培養瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測：無

基因表達情況：

保藏機構：中國典型培養物保藏中心細胞庫

培養基：90%DMEM+10%FBS+PS

培養條件：氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

細胞傳代培養操作步驟：

（1）當顯微鏡下細胞形態和生長密度達到90%時，進行傳代。

（2）吸棄培養液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。

（3）加入覆蓋瓶底量的且含有EDTA。

（4）培養瓶放入37℃培養箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養瓶使剩余細胞脫落，加入2倍量的中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。

（5）細胞懸液吸至離心管內，1000rpm/min離心3~5min。

（6）吸棄上清，加入培養液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。

（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養瓶中，補充培養液并搖勻，放置37℃的CO2培養箱進行培養。

（8）根據細胞生長狀態確定換液或傳代時間。

（9）細胞凍存

細胞接收后的處理：

1）收到細胞后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置約2-3h，若發現培養瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯系我們。

2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態的依據。

3）貼壁細胞：細胞在37℃培養箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養瓶中灌液培養基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養瓶中）,加入新配制的培養基6-8mL，放到細胞培養箱中繼續培養。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

公司正在出售的產品：

大鼠α1抗前體(pre-α1-AT)檢測試劑盒 ，英文名： pre-α1-AT ELISA Kit

Mouse protein phosphatase (PP) ELISA Kit 小鼠蛋酸酶(PP)檢測試劑盒

ELISA 小鼠血清淀粉樣蛋白(mouse SAA)  進口分裝

CLIAKitforIGFBP2(Humaninsulin-likegrowthfactorsbindingprotein2)ELISAKit人胰島素樣生長因子結合蛋白2

通用型牛輪狀病毒(ROTO)試劑盒20次

ELISAKitCyclin-D2大鼠細胞周期素D2

HA重組甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ?？窠浂舅?span>(35肽)

IL22RA2重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CTF1 Protein Human 重組人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

LAYN Protein Human 重組人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 標簽)

ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Gln9) ?？窠浂舅?span>(35肽)

CTF1 Protein Human 重組人 Cardiotrophin-1 / CTF1 蛋白

HA重組甲型流感 H1N2 (A/swine/Guangxi/13/2006) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

LAYN Protein Human 重組人 Layilin / LAYN 蛋白 (Fc 標簽)

IL22RA2重組人 IL22BP / IL22RA2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

hacat人永生化表皮細胞小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat thyroglobulin (TG) ELISA Kit 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)檢測試劑盒

HumanNeurokininsB,NKBELISAKit 人神經B(NKB)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Human3-Niotyrosine,3-檢測試劑盒人3-硝基酪(3-)檢測試劑盒規格：96T/48T

真菌/酵母總巰基含量比色法定量檢測試劑盒20次

Mouseai-Thyroid-Peroxidaseaibody,TPO-AbELISAKit小鼠抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠抗透明帶抗體(aZP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠粘蛋白/粘液素7(MUC7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠嗜酸性粒細胞陽離子蛋白(ECP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠Qa淋巴細胞抗原2(Qa-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T